fa اثر ضدسرطانی اپرپیتانت بر رده سلولی لوسمیک NB4 هماتولوژی Hematology تجربی Experimental <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">مطالعات ژنتیکی نشان داده&shy;اند که فعالیت مسیر نوروکینین 1، در پاتوژنز تعداد کثیری از بدخیمی&shy;های انسانی از جمله لوسمی پرومیلوسیتیک حاد (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Acute promyelocytic leukemia</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">APL</span></span><span style="font-size:10.0pt;">)، دخیل می&shy;باشد. فعالیت این مسیر در سلول&shy;های لوسمیک منجر به تکثیر بیش از حد سلول&shy;ها و فرار از آپوپتوز می&shy;گردد. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر اپرپیتانت (مهارکننده گیرنده نوروکینین 1) بر میزان بقا سلول&shy;های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">APL</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> می&shy;باشد.&nbsp; </span><br> <strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش&shy;ها:</span></span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">این مطالعه تجربی روی رده سلولی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">NB4</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، سلول&shy;هایی مشتق شده از لوسمی پرومیلوسیتیک حاد که از انستیتوپاستور تهیه گردید، انجام شد. به منظور بررسی اثر ضدتوموری اپرپیتانت، سلول&shy;های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">NB4</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> به 6 گروه تیمار شده با دارو در غلظت&shy;های 1، 2، 3، 4 و 5 میکرومولار و کنترل تقسیم شدند. سپس درصد زنده&shy;مانی سلول&shy;ها، فعالیت متابولیک، القاء آپوپتوز و همچنین بیان ژن&shy;های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bax</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> به ترتیب از طریق تست&shy;های تریپان&shy;بلو، </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MTT assay</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، رنگ&shy;آمیزی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Annexin/PI</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> طی مدت زمان 24 و 36 ساعت بررسی شد.</span><br> <strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته &shy;ها:</span></span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">تیمار 36 ساعته سلول&shy;های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">NB4</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> با بالاترین غلظت اپرپیتانت (5 میکرمولار)، درصد زنده&shy;مانی (ارزیابی شده توسط تریپان بلو) و فعالیت متابولیک سلول&shy;ها (ارزیابی شده توسط </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MTT assay</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) را به بیش از 50% (<span style="color:#0D0D0D;">0/001</span></span><span dir="LTR"><span style="color:#0D0D0D;"><span style="font-size:10.0pt;">p<</span></span></span><span style="font-size:10.0pt;">) در مقایسه با گروه کنترل کاهش داد. همچنین اپرپیتانت جمعیت سلول&shy;های آپوپتوتیک را از 1/4% در گروه کنترل به 10/6% در گروه تیمار شده با دوز 5 میکرومولار افزایش داد (0/05</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p<</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) و آپوپتوز را از طریق افزایش دو برابری نسبت بیان </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bax/Bcl-2</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> فعال نمود (0/05</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p<</span></span><span style="font-size:10.0pt;">).</span><br> <strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه&shy; گیری:</span></span></strong><span style="font-size:10.0pt;"> &nbsp;نتایج مطالعه نشان داد که اپرپیتانت قادر است اثرات کشندگی و ضدتکثیری خود را روی سلول&shy;های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">NB4</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> اعمال نماید.</span></span></p> <p dir="ltr" style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>BACKGROUND</strong> <strong>AND</strong> <strong>OBJECTIVE:</strong> </span>Genetic studies have demonstrated that the neurokini-1 Receptor (NK1R <span dir="RTL">(</span>is frequently involved in the pathogenesis of wide assortment of human malignancies, including acute promyelocytic leukemia (APL). The activity of this pathway in leukemic cells results in an excessive cell proliferation and evade from apoptosis. In this study, we aimed to investigate the effect of Aprepitant (NK1R antagonist) on the survival rate of APL cells.<br> <span style="color:#0000FF;"><strong>METHODS:</strong></span> This experimental study is conducted on APL-derived NB4 cells (Institute Pasteur). To determine the anti-tumor effect of Aprepitant, NB4 cells were divided into 6 groups: control and 1-, 2-, 3-, 4- and 5 &micro;M-drug treated groups. Then the cell viability, metabolic activity, induction of apoptosis and transcriptional alteration of Bax and Bcl-2 genes were investigated after 24 and 36 h treatment using trypan blue assay, MTT assay, Annexin-V/PI staining and RQ-PCR analysis, respectively.<br> <span style="color:#0000FF;"><strong>FINDINGS:</strong></span> 36 h treatment with the highest concentration of Aprepitant (5 &micro;M) resulted in an approximately 50% reduction in the viability (assessed by trypan blue) and metabolic activity (assessed by MTT assay) of NB4 cells (p<0.001) in comparison with control group. Moreover, Aprepitant is able to increase the proportion apoptotic cells from 1.4% in control group to 10.6% in 5 &micro;M drug-treated cells though up-regulating Bax/Bcl-2 molecular ratio (p&le;0.05).<br> <span style="color:#0000FF;"><strong>CONCLUSION:</strong></span> Aprepitant exerted both cytotoxic and anti-proliferative effects in NB4 cells.</span><br> &nbsp;</p> لوسمی پرومیلوسیتیک حاد, آپوپتوز, اپرپیتانت, رده سلولی NB4. Acute promyelocytic leukemia, Apoptosis, Aprepitant, NB4 cell line 28 34 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-3023-2&slc_lang=fa&sid=1 E Razani الهام رازانی E_razani_mls@yahoo.com 100319475328460028831 100319475328460028831 No Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی S Bayati سمانه بیاتی samabayat@gmail.com 100319475328460028832 100319475328460028832 No Institute of Biochemistry and Biophysics, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran موسسه بیوشیمی و بیوفیزیک، دانشگاه علوم پزشکی تهران A Safaroghli Azar آوا صفراوغلی آذر Ava_azari@yahoo.com 100319475328460028833 100319475328460028833 No Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی D Bashash داود بشاش David_5980@yahoo.com 100319475328460028834 100319475328460028834 Yes Department of Hematology and Blood Bank, Facuty of Allied Medical Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی AH Ghafari سید حمیدالله غفاری shghaffari200@yahoo.com 100319475328460028835 100319475328460028835 No Hematology-Oncology and Stem Cell Research Center, Faculty of Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran مرکز تحقیقات خـون، انکولوژی و پیونـد سلول‌های بنیادی بیمارستان شریعتی، دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران