Journal of Babol University of Medical Sciences
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بابل
J Babol Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jbums.org
1
admin
1561-4107
2251-7170
10.22088/jbums
fa
jalali
1396
2
1
gregorian
2017
5
1
19
5
online
1
fulltext
fa
اثر آپوپتوتیک مهار فسفاتیدیلاینوزیتول-3 کیناز با استفاده از بوپارلیسیب در رده سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد
Apoptotic Effect of Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibition on Acute Lymphoblastic Leukemia Cells Using Buparlisib
هماتولوژی
Hematology
تجربی
Experimental
<p dir="RTL" style="line-height: 16pt; text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">مقاومت به داروهای</span></span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">شیمی</span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">­د</span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">رمانی یکی از مهم­ترین معضلات درمانی بیماران مبتلاء به لوسمی لنفوبلاستیک حاد </span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">ALL</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">) </span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">می­باشد. اختلال در مسیر</span></span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">فسفاتیدیل­اینوزیتول-3 کیناز</span></span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">PI3K</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">) </span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">و همچنین ارتباط آن با بروز پدیده مقاومت باعث شده که مهارکننده­های این مسیر، خصوصا</span></span> <span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Buaprlisib</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">به عنوان یکی از امیدبخش­ترین داروهای درمان سرطان معرفی شوند. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر مهار مسیر </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">PI3K/Akt</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> توسط </span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">داروی </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Buparlisib</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> در کاهش بقا و همچنین القاء آپوپتوز در </span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">سلول</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">­</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">های</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:9.0pt;">Nalm-6</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">می­باشد. </span></span></span></p>
<p dir="RTL" style="line-height: 16pt; text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش­ها:</span></span></strong> <span style="font-size:10pt;">در این مطالعه تجربی، جهت سنجیدن اثر</span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Buparlisib</span></span> <span style="font-size:10.0pt;"> بر فعالیت مسیر </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">PI3K/Akt</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> در سلول­های</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Nalm-6</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، میزان فسفریلاسیون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Akt</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> توسط وسترن­بلات مورد ارزیابی قرار گرفت. جهت بررسی اثر سایتوتوکسیک این مهارکننده، سلول­های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Nalm-6</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> با غلظت­های مختلف </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Buparlisib</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> (4-0/5 میکرومولار) در زمان های 24، 36 و 48 ساعت تیمار شدند و سپس فعالیت متابولیک، القاء آپوپتوز و میزان تغییر بیان ژن­های دخیل در آپوپتوز توسط آزمون­های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span><span style="font-size:10.0pt;">، رنگ­آمیزی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Annexin/PI</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Rq-PCR</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> مورد ارزیابی قرار گرفت.</span></span></p>
<p dir="RTL" style="line-height: 16pt; text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته­ ها:</span></span></strong> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">نتایج نشان می­دهد که مهار مسیر </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">PI3K/Akt</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> توسط </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Buparlisib</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">، از طریق کاهش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p-Akt</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> <span style="color:black;">باعث اعمال اثر سایتوتوکسیک در سلول­های </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Naml-6</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> به صورت وابسته به دوز و زمان می­شود. همچنین، </span></span><span style="font-size:10pt;">نتایج بیان­گر آن است که احتمالاً تاثیر ضدلوسمیک </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10pt;">Buparlisib</span></span><span style="font-size:10pt;"> از طریق افزایش تقریباً 17 برابری سلول­های آپوپتوز شده</span> <span style="font-size:10pt;">(0/001</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10pt;">p≤</span></span><span style="font-size:10pt;">)، و افزایش بیان </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10pt;">mRNA</span></span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">ژن­های پروآپوپتوتیک صورت می­گیرد (</span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">0/01</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">p≤</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">)</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span></span></span></p>
<p dir="RTL" style="line-height: 16pt; text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong><span style="color:blue;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه ­گیری:</span></span></strong> <span style="font-size:10.0pt;">نتایج مطالعه نشان داد که </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Buparlisib</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> فعالیت ضدتوموری بر روی سلول­های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Nalm-6</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> باشد</span> <span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">دارد و می توان از آن به عنوان داروی امیدبخش در درمان </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">ALL</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;"> استفاده کرد. </span></span></span></p>
<p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>BACKGROUND</strong> <strong>AND</strong> <strong>OBJECTIVE:</strong></span> Resistance to chemotherapy is one of the most important problems in treatment of patients diagnosed with acute lymphoblastic leukemia (ALL). Pathway interruption of the phosphatidylinositol -3 kinase (PI3K) and its relation to resistance phenomena cause the inhibitors of this pathway, particularly buparlisib are introduced as one of the most promising cancer drugs. The aim of this study was to evaluate the effect of PI3K pathway inhibition on reducing the survival and induction of apoptosis in Nalm-6 cells using buparlisib<span dir="RTL">.</span></span></p>
<p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>METHODS:</strong></span> In this experimental study, the phosphorylation level of Akt was evaluated using western blot to measure the effect of buparlisib on PI3K/Akt pathway in Nalm-6 cells. Nalm-6 cells were treated with different concentrations of buparlisib (0.5-4 µM) for 24, 36 and 48 hours to study the cytotoxic effect of this inhibitor and then, the metabolic activity, induction of apoptosis and <em>changes</em> in <em>expression</em> <em>of genes involved</em> in <em>apoptosis</em> were evaluated using MTT assay, Annexin/PI staining and Rq-PCR, respectively.</span></p>
<p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>FINDINGS:</strong></span> Results showed that PI3K pathway inhibition using buparlisib causes the cytotoxic effect on Nalm-6 cells in a dose- and time-dependent manner through reducing p-Akt. These findings suggested that probably, the anti-leukemic effect of buparlisib is mediated through almost 17-fold increase in apoptotic cells (p≤0.001) and rising the mRNA expression level of pro-apoptotic genes (p≤0.01).</span></p>
<p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="color:#0000FF;"><strong>CONCLUSION:</strong> </span>The results indicated that buparlisib has anti-tumor activity against Nalm-6 cells so this inhibitor can be used as a promising agent for the treatment of ALL.</span></p>
آپوپتوز, فسفاتیدیل-3 کیناز, لوسمی لنفوبلاستیک حاد, Buparlisib, Nalm-6.
7
13
http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-3023-1&slc_lang=fa&sid=1
MR
Sadri
محمدرضا
صدری
Sadri.mohamadreza@gmail.com
100319475328460026221
100319475328460026221
No
Department of Hematology and Blood banking, Faculty of Allied Medicine sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran
گروه خونشناسی و بانکخون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
A
Safaroghli Azar
آوا
صفراوغلی آذر
Ava_azari@yahoo.com
100319475328460026222
100319475328460026222
No
Department of Hematology and Blood banking, Faculty of Allied Medicine sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran
گروه خونشناسی و بانکخون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
AR
Kazemi
علیرضا
کاظمی
al.kazemi@yahoo.com
100319475328460026223
100319475328460026223
No
Department of Hematology and Blood banking, Faculty of Allied Medicine sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran
گروه خونشناسی و بانکخون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
M
Hamidpour
محسن
حمیدپور
mohsenhp@sbmu.ac.ir
100319475328460026224
100319475328460026224
No
Department of Hematology and Blood banking, Faculty of Allied Medicine sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran
گروه خونشناسی و بانکخون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
M
Allahbakhshian Frasani
مهدی
اله بخشیان فارسانی
m.bakhshian1360@gmail.com
100319475328460026225
100319475328460026225
No
Department of Hematology and Blood banking, Faculty of Allied Medicine sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran
گروه خونشناسی و بانکخون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
D
Bashash
داود
بشاش
David_5980@yahoo.com
100319475328460026226
100319475328460026226
Yes
Department of Hematology and Blood banking, Faculty of Allied Medicine sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, I.R.Iran
گروه خونشناسی و بانکخون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی