Journal of Babol University of Medical Sciences

en اثرات آنزیم سرین استخراج شده از کرم خاکی Lumbricus terrestris در بیان پروتئین مرتبط با آپوپتوز در رده سلولی M‌CF-7 Effects of Serine Enzyme Extracted from Earthworm Lumbricus Terrestris in the Expression of Apoptosis-Related Protein on the MCF-7 Cell Line ژنتیک، بیولوژی سلولی و مولکولی Genetics, Cell and Molecular Biology تحقیقی Research <pre aria-label="Translated text: مقدمه: سرطان عامل اصلی مرگ و میر در سراسر جهان است، شایع ترین نوع سرطان در زنان در سراسر جهان سرطان سینه است. سالانه حدود 2.3 میلیون مورد جدید سرطان سینه گزارش می شود. کرم‌های خاکی در پزشکی برای درمان انواع بیماری‌ها استفاده می‌شوند، زیرا عصاره‌های بدن آن‌ها دارای انواع مختلفی از مواد فعال زیستی (مانند پروتئین‌ها و پپتیدها) هستند. آنزیم سرین آنزیم خالص شده از کرم خاکی دارای فعالیت ضد توموری قابل توجهی در برابر سلول سرطانی انسان است. هدف از این مطالعه تعیین مکانیسم هایی بود که توسط آن پروتئازهای سرین القای آپوپتوز و بررسی بیان تعدادی از پروتئین های مرتبط با آپوپتوز در رده سلولی تیمار شده و تیمار نشده (MCF-7) با استفاده از ریزآرایه بود. روش‌ها آنزیم سرین را از کرم‌های خاکی Lumbricus terrestris و با استفاده از رده سلولی MCF 7 در آزمایش خالص‌سازی و با آنزیم سرین تیمار کردند. نتایج نشان داد که درمان سلول‌های MCF-7 با یک پروتئاز سرین منجر به تغییر در اکثر پروتئین‌های مرتبط با آپوپتوز می‌شود. درمان سلول‌های MCF-7 با سرین پروتئاز منجر به تنظیم پایین cIAP-2، Livin، XIAP، Survivin، BCLw، BAD، BAX، BID، BIM، cytoC و P53 با افزایش بیان کاسپاز 3، کاسپاز 8 و SMAC شد. در مقابل سلول های درمان نشده در نتیجه این نتایج گواه بر این فرضیه است که سرین پروتئاز توانایی تسهیل سوراخ شدن غشای میتوکندری و همچنین برش کاسپاز 3 را در مرگ سلولی آپوپتوز دارد." class="tw-data-text tw-text-large tw-ta" data-placeholder="Translation" data-ved="2ahUKEwifq_3iuO-JAxWsRKQEHf7-JqUQ3ewLegQIEBAT" dir="rtl" id="tw-target-text" style="text-align: justify;"> سابقه و هدف: سرطان عامل اصلی مرگ و میر در سراسر جهان است و سرطان سینه شایع‌ترین نوع سرطان در زنان در سراسر جهان است. کرم‌های خاکی در پزشکی برای درمان انواع بیماری‌ها استفاده می‌شوند، زیرا عصاره‌ بدن آن‌ها دارای انواع مختلفی از مواد فعال زیستی (مانند پروتئین‌ها و پپتیدها) می‌باشد. آنزیم سرین خالص ‌شده از کرم خاکی فعالیت ضد توموری قابل توجهی علیه سلول‌های سرطانی انسان دارد. هدف از این تحقیق، تعیین مکانیسم‌هایی است که توسط آن سرین پروتئازها موجب القای آپوپتوز می‌شوند و همچنین بررسی بیان تعدادی از پروتئین‌های مرتبط با آپوپتوز در رده سلولی MCF-7 تیمار شده و تیمار نشده با استفاده از تکنیک ریزآرایه می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه آزمایشگاهی، کرم‌های خاکی سالم و کاملاً بالغ پس از هفت روز رشد در خاک غنی شده با هوموس با اسپری‌های متناوب آب در یک محیط آزمایشگاهی کنترل‌ شده، جمع‌آوری شدند. پس از کاشت، سرین پروتئاز Lumbericas terrestris به 105 سلول در میلی‌لیتر از سلول‌های MCF-7 اضافه شد و تیمار به مدت 24 ساعت با غلظت IC50 ادامه یافت. سلول‌های تیمار نشده به عنوان کنترل منفی در نظر گرفته شدند. پس از یک دوره تیمار 24 ساعته، سلول‌های تیمار شده با MCF جمع‌آوری و به مدت پنج دقیقه با سرعت 2500 دور در دقیقه و دمای 4 درجه سانتی‌گراد چرخانده شدند. آنزیم سرین از کرم‌های خاکی Lumbricus terrestris تا حدی خالص‌سازی شد و رده سلولی MCF-7 با آنزیم سرین تیمار شد. یافته ها: نتایج نشان داد که تیمار سلول‌های MCF-7 با سرین پروتئاز منجر به تغییر در اکثر پروتئین‌های مرتبط با آپوپتوز می‌شود. تیمار سلول‌های MCF-7 با سرین پروتئاز منجر به کاهش بیان cIAP-2 (7/2±632 و 4/8±275)، Livin (4/7±220 و 2/1±95)، XIAP، Survivin، BCLw، BAD، BAX، BID، BIM، cytoC و P53 و افزایش بیان کاسپاز 3 (1/5±83 و 4/9±493)، کاسپاز 8 (3/33±285 و 7/65±610) و SMAC در مقایسه با سلول‌های تیمار نشده گردید. نتیجه گیری: نتایج مطالعه نشان داد که سرین پروتئاز توانایی تسهیل پرفوراسیون غشای میتوکندری و همچنین تجزیه کاسپاز 3 در مرگ سلولی آپوپتوزی را دارد. </pre> <div style="text-align: justify;">Background and Objective: Cancer is the leading cause of death worldwide, and breast cancer is the most common type of cancer in women worldwide. Earthworms have been used in medicine to cure a variety of diseases because their body extracts have a variety of bioactive substances (such as proteins and peptides). Serine enzyme is an enzyme purified from the earthworm with a significant antitumor activity against human cancer cell. The aim of the study is to determine the mechanisms by which serine proteases induce apoptosis and to examine the expression of a number of apoptosis-associated proteins in treated and untreated (MCF-7) cell line using microarray. Methods: In this laboratory study, healthy and fully mature earthworms were collected. After seven days of growing in humus-enriched soil with intermittent water sprays in a controlled laboratory setting.  Lumbericas terrestris serine protease was added to 1x105 cells/mL of MCF-7 cells after they were seeded, and the treatment lasted for 24 hours at IC50 concentration. Untreated cells were employed as a negative control. Following a 24-hour treatment period, MCF-treated cells were collected and spun down for five minutes at 2500 rpm and 4°C. Serine enzyme was partially purified from earthworms Lumbricus terrestris and the MCF-7 cell line was treated with serine enzyme. Findings: The results showed that treatment of MCF-7 cells with serine protease led to changes in most apoptosis-related proteins. Treatment of MCF-7 cells with serine protease resulted in downregulation of cIAP-2 (632±7.2 & 275±4.8), Livin (220±4.7 & 95±2.1), XIAP, Survivin, BCLw, BAD, BAX, BID, BIM, cytoC and P53 with an increased expression of caspase 3 (83±1.5 & 493±4.9), caspase 8 (285±3.33 &610±7.65) and SMAC compared to untreated cells. Conclusion: The results of the study showed that serine protease has the ability to facilitate perforation of mitochondrial membrane as well as caspase 3 cleavage in apoptotic cell death.  </div> سرین, کرم خاکی, Mcf-7, پروتئین آپوپتوز, ریزآرایه. Serine, Earthworm, Mcf-7, Apoptosis Protein, Microarray. 0 0 http://jbums.org/browse.php?a_code=A-10-8403-1&slc_lang=en&sid=1 A Abdel Salam Qassem ایمن عبدالسلام قاسم aymansalam@uomustansiriyah.edu.iq 100319475328460069879 0009-0005-4286-8822 Yes 1.College of Dentistry, Mustansiriyah University, Baghdad, Iraq. 1. دانشکده دندانپزشکی، دانشگاه مستنصریه، بغداد، عراق N Faleh نبراس فلاح gmoon4444@uomustansiriyah.edu 100319475328460069880 100319475328460069880 No 2.Department of Biology, College of Science, Mustansiriyah University, Baghdad, Iraq. ۲. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه مستنصریه، بغداد، عراق FA Ali Shafi فرح ع. علی شفیع szfs@uomustansiriyah.edu.iq 100319475328460069881 100319475328460069881 No 2.Department of Biology, College of Science, Mustansiriyah University, Baghdad, Iraq. ۲. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه مستنصریه، بغداد، عراق